聚糖色譜柱在生物化學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用,主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
一、聚糖分析與分離
聚糖色譜柱是一種基于高效液相色譜(HPLC)技術(shù)的工具,專門用于中性與帶電荷聚糖的表征、純化和分離。它廣泛應(yīng)用于生化研究,特別是在分析和分離蛋白質(zhì)連接的聚糖時(shí)發(fā)揮重要作用。通過(guò)聚糖色譜柱,研究人員可以對(duì)聚糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和定量分析,這對(duì)于理解聚糖在生物體內(nèi)的功能以及疾病機(jī)制具有重要意義。
二、藥物分析
聚糖色譜柱還專門開發(fā)用于《中國(guó)藥典》中規(guī)定的多種抗生素高分子聚合物的測(cè)定,如阿莫西林高分子聚合物、頭孢拉定高分子聚合物、頭孢曲松高分子聚合物和頭孢他啶高分子聚合物等。這種應(yīng)用體現(xiàn)了聚糖色譜柱在藥物質(zhì)量控制和藥物分析中的重要作用。
三、技術(shù)特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)
高效快速:聚糖色譜柱基于Fused-Core®技術(shù),具有快速、高效的特點(diǎn)。使用高極性固定相,如HALO Glycan,通過(guò)創(chuàng)新的化學(xué)鍵合技術(shù)將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層,從而提高了分離效率和速度。
分離度高:聚糖色譜柱能分離不同連接的同分異構(gòu)的低聚糖,具有較高的分離度。這使得它在復(fù)雜樣品的分析中更具優(yōu)勢(shì)。
穩(wěn)定性好:聚糖色譜柱對(duì)鹽濃度不敏感,能在各種條件下保持穩(wěn)定性。這種穩(wěn)定性使得它在多種實(shí)驗(yàn)條件下都能得到可靠的結(jié)果。
操作簡(jiǎn)便:聚糖色譜柱的使用相對(duì)簡(jiǎn)便,不需要特殊的高壓裝置和專業(yè)的技能。研究人員只需掌握一些基本的實(shí)驗(yàn)操作技巧即可進(jìn)行聚糖的分析和分離。
四、使用注意事項(xiàng)
在使用聚糖色譜柱時(shí),需要注意以下幾點(diǎn)以確保其性能和使用壽命:
避免有機(jī)溶劑和氣泡:在使用前,需要用水沖洗整個(gè)色譜系統(tǒng),以避免管路中的有機(jī)溶劑和氣泡進(jìn)入色譜柱。
流速控制:在開啟泵時(shí),要小流速開啟,不要快速加大流速,以防止力迅猛升而導(dǎo)致柱床損壞。對(duì)于不同規(guī)格的柱子,流速有不同的限制,如15mm的柱子流速不要超過(guò)3ml/min。
清洗與保存:每次使用后,需要用蒸餾水沖洗干凈,并將含鹽的流動(dòng)相置換干凈。若較長(zhǎng)時(shí)間不使用,需要按照保存方法妥善保存。